پاورپوینت فلوسایتومتری و کروماتوگرافی

فرمت فایل: ppt

تعداد اسلاید: 31 اسلاید

قابلیت ویرایش: دارد

تصویری از خود فایل رو میتونید مشاهده کنید.

قسمتی از متن این پاورپوینت که به صورت تصادفی انتخاب شده:

فلوسايتومتري روش دستگاهي بسيار سريع و قدرتمندي است كه براي شناسايي ذرات (سلول‌ها) و ارزيابي خصوصيّات آنها به كار مي‌رود.

ذرات مورد آزمايش به صورت معلق در مايع با سرعتي حدود 5 تا 50 متر در ثانيه از ميان منفذي باريك و از مقابل پرتوي باريك از نور ليزر عبور مي‌كنند بدين ترتيب امكان جمع‌آوري اطلاعات مربوط به 5000 تا 50000 سلول در هر ثانيه فراهم مي‌شود.

غالباً حجم مورد نياز از نمونه مورد آزمايش نيز خيلي كم و حدود 100 ميكروليتر مي‌باشد.

ویژگی های فلوسایتومتری و کروماتوگرافی

• روش کروماتوگرافی

کروماتوگرافی یک سری روش هایی است که برای جداکردن موادی که به صورت مخلوط هستند به کار برده می شوند. تمام روش های کروماتوگرافی شامل استفاده از دو فاز هستند : فاز ثابت و فاز متحرک فاز ثابت مایع و یا جامد و فاز متحرک گاز و مایع می باشد.

• روش کروماتوگرافی

هم اکنون انواع مختلفی از روش های کروماتوگرافی برای جداسازی و شناسایی ترکیبات مختلف سلولی به کار گرفته می شود که مهمترین آن ها عبارتند از :

-کروماتوگرافی کاغذی

-کروماتوگرافی لایه نازک

-کروماتوگرافی تبادل یونی

-صاف کردن بوسیله ژل

-کروماتوگرافی مایع با کارآیی بالا HPLC

– گاز کروماتوگرافی

• 
  موارد استعمال کروماتوگرافی کاغذی
  

منابع علمی مربوط به روش‌های تجزیه‌ای و بررسی ترکیبات طبیعی نشان می‌دهد که کروماتوگرافی کاغذی در هر رشته‌ای کاربرد دارد. با این همه ، این روش هنوز هم در جداسازی‌های مواد با ماهیت زیستی وسیعترین کاربرد را دارد.

مقایسه با کروماتوگرافی کاغذی:

روش لایه نازک دارای مزیت عمده سرعت بیشتر ، در اکثر موارد ، جداسازی مواد بهتر می‌باشد. زمان متوسط برای حرکت حلال به مقدار 10 در کروماتوگرافی لایه نازک روی سیلیکاژل 30 – 20 دقیقه است، در صورتی که همان جداسازی مواد بر روی یک کاغذ سریع ممکن است 2 ساعت طول بکشد. دیگر این که به خاطر آزادی عمل در انتخاب لایه جاذب تفکیک به نحو بهتر و موثرتری انجام می پذیرد.

• کروماتوگرافی تبادل یونی

پروتئین ها و دیگر مولکول های باردار را می توان توسط کروماتوگرافی تبادل یونی تفکیک و جدا نمود . برای این منظور از استوانه های شیشه ای که توسط دانه های رزین پر شده اند استفاده می گردد.

• صاف کردن به وسیله ژل
• بنابراین اجزاي مخلوط به ترتيب جرم مولکولي از ستون خارج مي‌شوند يعني ابتدا بزرگترين مولکول خارج مي‌شود. ترکيباتي که اصلا وارد ژل نمي‌شوند و نیز مولکول‌هاي کوچکي که کاملا در ژل نفوذ مي‌کنند از يکديگر جدا نمي‌شوند. مولکول‌هاي با اندازه متوسط بر حسب درجه نفوذ آنها در قالب نگه داشته مي‌شوند. اگر مواد ترکيب مشابه داشته باشند، به ترتيب جرم مولکولي نسبي از ستون شسته مي‌شوند.

ویژگی های فلوسایتومتری و کروماتوگرافی